重组耐热融合型左聚糖蔗糖酶的表达优化

作者：黄叶梅; 杨海波; 郭晓磊; 李蕾; 赵资; 杨辉^*

来源：轻工科技, 2023, 39(02): 1-39.

• 耐热
• 融合型左聚糖蔗糖酶
• 表达优化
• 响应面

为提高重组耐热融合型左聚糖蔗糖酶(TPS-SacB-T305A)在大肠杆菌中的表达量，在单因素条件优化的基础上，将重组耐热融合型左聚糖蔗糖融合酶的水解活力(OD540nm)作为响应值R进行Box-Behnken实验。所得优化条件为：接种量3.0%(v/v)，诱导时间为20 h,IPTG浓度为0.9 mmol/L，诱导温度为23℃，此时响应值R=1.33。利用此优化条件在摇瓶中发酵产重组耐热融合型左聚糖蔗糖酶，经破细胞提取粗酶液，其水解活力的均值达123 U/mL，比单因素优化结果提高了28.65%。本研究为该新型重组酶的后续应用性质和耐热机理的深入研究提供了实验材料和研究基础。

• 单位
  亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室