右美托咪定对内毒素致小鼠巨噬细胞凋亡时HIF-1α表达的影响

作者：毛幸; 陈红光; 闫梦莹; 冯竞成; 王国林; 谢克亮; 于泳浩^*

来源：中华麻醉学杂志, 2018, 38(12): 1505-1508.

• 右美托咪啶
• 内毒素类
• 巨噬细胞
• 线粒体
• 细胞凋亡
• 缺氧诱导因子,1α亚基

目的评价右美托咪定对内毒素致小鼠巨噬细胞凋亡时缺氧诱导因子-1(HIF-1α)表达的影响。方法体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,将细胞接种于6孔板或96孔板,待融合度为60%～70%时,采用随机数字表法分为4组(n=16):对照组(Con组)、右美托咪定组(Dex组)、脂多糖组(LPS组)和LPS+右美托咪定组(LPS+Dex组)。Con组加入PBS缓冲液;Dex组加入1μmol/L右美托咪定;LPS组和LPS+Dex组均给予1μg/ml的LPS;LPS+Dex组于加入LPS后立即给予1μmol/L右美托咪定,各组孵育24 h。采用TUNEL法测定细胞凋亡率,采用JC-1法测定线粒体膜电位水平,采用荧光酶标仪法测定ROS含量,采用酶标仪法测定ATP含量,采用Western blot法测定HIF-1α、细胞色素c(Cyt c)、caspase-9和cleaved caspase-3的表达水平。结果与Con组相比,LPS组巨噬细胞凋亡率和ROS含量升高,ATP含量和线粒体膜电位水平降低,HIF-1α、Cyt c、caspase-9和cleaved caspase-3表达上调(P<0.05),Dex组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与LPS组相比,LPS+Dex组巨噬细胞凋亡率和ROS含量降低,ATP含量和线粒体膜电位水平升高,HIF-1α表达上调,Cyt c、caspase-9和cleaved caspase-3表达下调(P<0.05)。结论右美托咪定可减轻内毒素致巨噬细胞氧化应激损伤,改善线粒体功能,抑制线粒体途径凋亡,其机制可能与上调HIF-1α表达有关。

• 单位
  天津医科大学总医院