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摘要
目的探讨二氢杨梅素(DMY)对食管鳞癌细胞KYSE150和KYSE410增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法采用不同浓度(0、25、50、100、150、200 μmol/L)的DMY处理KYSE150和KYSE410细胞24 h, 采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测KYSE150和KYSE410细胞的半数抑制浓度(IC50)值。以0.5‰二甲基亚砜(DMSO)组为对照组、DMY、DMY+转化生长因子β1(DMY+TGF-β1)、转化生长因子β1(TGF-β1)为实验组, 采用克隆形成实验和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况, Transwell侵袭实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力, Western blot法检测半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)、细胞信号转导分子Smad2/3(Smad2/3)、磷酸化细胞信号转导分子Smad2/3(p-Smad2/3)、波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达水平。结果 DMY对KYSE410和KYSE150细胞IC50值分别为100.51和101.27 μmol/L。DMY组KYSE150和KYSE410细胞克隆形成数分别为(0.53±0.03)个和(0.31±0.03)个, 均低于DMSO组[分别为(1.00±0.10)个和(1.00±0.05)个, 均P<0.05], DMY组KYSE150和KYSE410细胞凋亡率分别为(1.84±0.22)%和(2.80±0.07)%, 均高于DMSO组[分别为(1.00±0.18)%和(1.00±0.07)%, 均P<0.05], DMY组KYSE150和KYSE410细胞侵袭数分别为(0.42±0.03)个和(0.29±0.05)个, 均低于DMSO组[分别为(1.00±0.08)个和(1.00±0.05)个, 均P<0.05], DMY组KYSE150和KYSE410细胞迁移率分别为(0.65±0.14)%和(0.40±0.17)%, 均低于DMSO组[分别为(1.00±0.10)%和(1.00±0.08)%, 均P<0.05]。TGF-β1组KYSE150和KYSE410细胞克隆形成数分别为(1.01±0.08)个和(0.99±0.25)个, 均高于DMY+TGF-β1组[分别为(0.73±0.10)个和(0.58±0.05)个, 均P<0.05], TGF-β1组KYSE150和KYSE410细胞凋亡率分别为(0.81±0.14)%和(1.18±0.10)%, 均低于DMY+TGF-β1组[分别为(1.38±0.22)%和(1.85±0.04)%, 均P<0.05], TGF-β1组KYSE150和KYSE410细胞侵袭数分别为(1.19±0.11)个和(1.39±0.11)个, 均高于DMY+TGF-β1组[分别为(0.93±0.09)个和(0.93±0.05)个, 均P<0.05], TGF-β1组KYSE150和KYSE410细胞迁移率分别为(1.87±0.19)%和(1.32±0.04)%, 均高于DMY+TGF-β1组[分别为(0.86±0.16)%和(0.77±0.12)%, 均P<0.05]。DMY组KYSE150和KYSE410细胞中Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平高于DMSO组, Bcl-2蛋白表达水平低于DMSO组(均P<0.05);DMY组KYSE150和KYSE410细胞中p-Samd2/3、Smad2/3和Vimentin蛋白的表达水平低于DMSO组(均P<0.05)。TGF-β1组KYSE150和KYSE410细胞中Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平低于DMY+TGF-β1组, Bcl-2蛋白表达水平高于DMY+TGF-β1组(均P<0.05), DMY+TGF-β1组KYSE150和KYSE410细胞中Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平低于DMY组, Bcl-2蛋白表达水平高于DMY组(均P<0.05), TGF-β1组KYSE150和KYSE410细胞中p-Samd2/3、Smad2/3和Vimentin蛋白的表达水平高于DMY+TGF-β1组(均P<0.05)。结论 DMY可以抑制TGF-β1介导的食管鳞癌细胞增殖及EMT且促进细胞凋亡。
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单位公共卫生学院; 唐山市工人医院; 生命科学学院; 华北理工大学
