微小RNA-184通过Janus激酶2/信号转导与转录激活因子3途径下调B细胞淋巴瘤/白血病-2样蛋白1介导骨肉瘤的化疗耐药的机制

作者：杨继峰; 唐豪杰; 杨猛; 贺鑫; 李毅^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(05).

• 微小RNA
• Janus激酶2/信号转导与转录激活因子3
• B细胞淋巴瘤/白血病-2样蛋白1
• 骨肉瘤
• 耐药性

目的探究微小RNA(miRNA, miR)-184通过Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路影响B细胞淋巴瘤/白血病-2样蛋白1(BCL2L1)参与骨肉瘤细胞化疗耐药性的机制。方法选用骨肉瘤细胞株MG63, 采用聚合酶链反应(PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)等方法检测其中miR-184表达水平以及JAK2/STAT3、BCL2L1蛋白表达;转染miR-184模拟物、抑制物序列, 观察对MG63、顺铂培养下的MG63(DPP-MG63)的影响, 另将JAK2/STAT3通路抑制剂AG490与细胞一起培养, 观察细胞变化。采用独立样本t检验, 多组间比较采用单因素方差分析及组内两两比较LSD-t检验进行统计学分析。结果 miR-184在骨肉瘤细胞中降低(t=9.074, P<0.05), 在过表达miR-184后骨肉瘤细胞的增殖、侵袭能力减弱, 凋亡率升高(F=13.810、57.090、59.660, P<0.05), 且其中JAK2/STAT3通路的蛋白表达、BCL2L1蛋白(0.92±0.04)均被抑制, 细胞耐药性降低(F=186.200、252.900、211.600、156.200、176.500, P<0.05), 而抑制miR-184则反之。同样, 在经AG490培养后, 细胞的增殖、侵袭能力降低, 耐药性降低, BCL2L1蛋白表达(0.84±0.05)则升高(F=11.270、38.300、77.130, P<0.05)。拯救实验显示, 沉默miR-184后的细胞再与AG490进行培养, 细胞生物学行为、耐药性与MG63、DPP-MG63细胞比较差异均无统计学意义(t=0.612、0.059、0.050、0.612, P>0.05)。结论 miR-184通过激活JAK2/STAT3信号通路, 抑制BCL2L1的表达, 促进骨肉瘤细胞的生长, 并降低耐药性。

• 单位
  郑州大学第二附属医院; 河南省第三人民医院