miR-206通过靶向GREM1调节鼻咽癌细胞的增殖、迁移能力

作者:邵倩倩; 王晓敏; 李慧; 苏凯; 王梦君; 马士崟*
来源:山西医科大学学报, 2022, 53(06): 685-692.
DOI:10.13753/j.issn.1007-6611.2022.06.005

摘要

目的 探讨miR-206对鼻咽癌细胞增殖、迁移的影响及其机制。方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测鼻咽癌细胞株(NP69、CNE2、HNE1、6-10B及5-8F)中miR-206的表达水平,然后选择miR-206表达水平较低的鼻咽癌细胞株HNE1和CNE2作为实验对象,将每株细胞均分为两组:NC组和miR-206 mimics组,分别转染无意义序列NC和miR-206 mimics。采用MTT法、细胞集落克隆检测细胞的增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。使用公共数据库GEPIA(Gene Expression Profiling Interactive Analysis)分析Gremlin1(GREM1)在人鼻咽癌组织和癌旁组织中的表达,蛋白质印迹实验(Western blot)检测鼻咽癌细胞中N-catenin、Vimentin及GREM1蛋白表达量,采用qRT-PCR检测鼻咽癌细胞中GREM1 mRNA的表达水平。使用生物信息学网站CoGeMiR、MicroRNAdb预测miR-206可能的靶基因,采用Transwell Boyden小室法检测过表达GREM1对鼻咽癌细胞迁移能力的影响。结果 在鼻咽癌细胞HNE1、CNE2中,miR-206 mimics组细胞存活率、克隆细胞集落数目、细胞迁移数目,N-catenin、Vimentin蛋白的表达均低于NC组(P<0.05)。GREM1在人鼻咽癌组织中表达水平高于癌旁组织,miR-206 mimics组的GREM1的mRNA及蛋白表达水平较NC组下调(P<0.05)。生物信息学网站CoGeMiR、MicroRNAdb预测miR-206与GREM1 mRNA存在结合位点。过表达GREM1后鼻咽癌HNE1、CNE2细胞的迁移能力增强(P<0.05)。结论 miR-206对鼻咽癌细胞株HNE1、CNE2的细胞增殖、迁移和上皮间充质化(EMT)有抑制作用,这可能与其对GREM1表达的调控有关。

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