摘要

目的 探讨Toll样受体(TLR)3活化对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响及其机制。方法 将对数生长期的HUVECs随机分为A组、B组、C组、D组、E组和F组,分别以含0.000、0.001、0.010、0.100、1.000、10.000 mg·L-1聚肌胞苷酸[Poly (I:C)]的培养基培养24 h,备用。采用Western blot法检测6组HUVECs中TLR3及pro-caspase-3、caspase-3 P17蛋白相对表达量,并计算caspase-3 P17与pro-caspase-3蛋白相对表达量比值(caspase-3 P17/pro-caspase-3)。采用反转录-聚合酶链式反应法检测6组HUVECs中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)、死亡受体(DR)4和DR5 mRNA相对表达量。结果 B组、C组、D组、E组、F组细胞中TLR3蛋白相对表达量显著高于A组,C组、D组、E组、F组细胞中TLR3蛋白相对表达量显著高于B组,D组细胞中TLR3蛋白相对表达量显著高于C组,E组、F组细胞中TLR3蛋白相对表达量显著低于D组,F组细胞中TLR3蛋白相对表达量显著低于E组(P<0.05)。B组、C组细胞中caspase-3 P17/pro-caspase-3显著低于A组,D组、E组、F组细胞中caspase-3 P17/pro-caspase-3显著高于A组、B组、C组,F组细胞中caspase-3 P17/pro-caspase-3显著低于D组、E组(P<0.05)。B组、C组、D组、E组、F组细胞中TRAIL mRNA相对表达量显著高于A组,C组、D组、E组、F组细胞中TRAIL mRNA相对表达量显著高于B组,E组、F组细胞中TRAIL mRNA相对表达量显著高于C组和D组,F组细胞中TRAIL mRNA相对表达量显著低于E组(P<0.05)。C组、D组、E组、F组细胞中DR4 mRNA相对表达量显著高于A组和B组,D组、E组、F组细胞中DR4 mRNA相对表达量显著高于C组,E组、F组细胞中DR4 mRNA相对表达量显著高于D组,F组细胞中DR4 mRNA相对表达量显著高于E组(P<0.05)。B组、C组、D组、E组、F组细胞中DR5 mRNA相对表达量显著高于A组,E组、F组细胞中DR5相对表达量显著高于B组、C组、D组(P<0.05)。结论 Poly(I:C)活化TLR3可能引起HUVECs凋亡,其机制可能涉及外源性凋亡途径TRAIL-DR4/DR5。