添加扩增内标的PCR方法快速检测食品中的沙门氏菌

作者:张德福; 付绪磊; 汤轶伟; 白凤翎; 殷喆; 杨文慧; 赵丽红; 张义全; 李春; 励建荣
来源:食品工业科技, 2015, 36(24): 54-63.
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2015.24.002

摘要

为了建立一种含扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法,以细菌16S r RNA为扩增内标对照,以沙门氏菌inv A基因为靶基因设计了一对引物,并优化了PCR反应体系。通过对20种细菌进行PCR检测显示,该方法对沙门氏菌具有良好的特异性。灵敏度实验表明,该检测方法对沙门氏菌纯DNA模板的检测灵敏度为61.1 fg/μL,对沙门氏菌纯培养物的检测灵敏度为2×102 cfu/m L。对人工污染蛋清的检测实验显示,沙门氏菌接种量为2 cfu/25 m L的鸡蛋清样品经过8 h增菌培养后,可被该方法检出。结果表明,该检测方法特异性强、灵敏度高,能排除沙门氏菌PCR检测方法中可能出现的假阴性现象,适用于鸡蛋等食品中沙门氏菌的快速检测。

  • 单位
    军事医学科学院; 江苏大学; 渤海大学; 病原微生物生物安全国家重点实验室; 数理学院

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