NRTIs引起的细胞线粒体DNA缺失的检测及其意义

作者：孙玉; 张洪海; 石英; 柳雅立; 张彤; 吴昊; 陈德喜

来源：中国艾滋病性病, 2010, 16(02): 144-148.

DOI：10.13419/j.cnki.aids.2010.02.006

• 核苷类逆转录酶抑制剂
• DNA,线粒体
• 聚合酶链反应

目的应用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time fluorescence quantitative PCR)检测核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)司它夫定(d4T)与齐多夫定(AZT),对HepG2细胞线粒体DNA数量的影响,并探讨其意义。方法用0、3、10、100、200、300μmol/L d4T及AZT处理HepG2细胞2周,应用实时荧光定量PCR检测不同浓度药物作用后线粒体DNA的相对含量。结果成功建立线粒体DNA的定量PCR检测方法。d4T组中,药物浓度为0、3、10、100μmol/L的4个组,细胞线粒体DNA相对含量分别为(96.94±5.77)、(53.73±7.14)、(20.78±3.10)、(1.37±0.29),4个组比较差异有统计学意义(P<0.01);而药物浓度为200及300μmol/L的两个组,细胞均死亡。AZT用药组中,药物浓度为0-300μmol/L的6个组,细胞线粒体DNA相对含量分别为(96.94±5.77)、(108.84±7.80)、(172.56±4.70)、(199.51±10.37)、(158.74±6.64)、(64.06±6.27),差异有统计学意义(P<0.01)。结论实时荧光定量PCR检测细胞线粒体DNA方法切实可行,d4T引起细胞线粒体DNA缺失呈浓度依赖性,AZT对细胞线粒体DNA的影响表现为先增高后降低,其机制有待进一步研究。

• 单位
  首都医科大学附属北京佑安医院