镧离子和酸根离子在镧盐诱导HepG2细胞特定基因表达改变中的作用

作者：邢云昆; 陈洁; 周小琰; 马雪; 周川; 付娟玲; 祁妍敏; 郝卫东; 姚碧云^*; 赵鹏^*

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2022, 36(12): 910-918.

• 硫酸镧
• 氯化镧
• 硝酸镧
• 酸根离子
• 细胞色素P450家族1A1
• 细胞,HepG2

目的 探究镧离子(La3+)与酸根离子(SO42-,Cl-和NO3-)在镧盐诱导Hep G2细胞特定基因表达改变中的作用。方法 分别将含有La2(SO4)30.71 mmol·L-1、La Cl31.41 mmol·L-1、La(NO3)31.41 mmol·L-1、H2SO42.12 mmol·L-1、HCl 4.23 mmol·L-1和HNO34.23 mmol·L-1的培养液在CO2培养箱中进行酸碱平衡1 h,p H值可恢复到7.25，随后分别处理对数生长期Hep G2细胞48 h。采用CCK-8试剂盒检测受试物对细胞存活率的影响。采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测丙氨酰氨基肽酶(ANPEP)、细胞色素P450家族1A1(CYP1A1)、氧化固醇结合蛋白样7(OSBPL7)、CYP3A5、钙电压门控通道辅助亚单位γ4(CACNG4)、双特异性磷酸酶4(DUSP4)、Ras蛋白特异性鸟嘌呤核苷酸释放因子1(RASGRF1)和CYP17A1 m RNA表达水平。结果 CCK-8法检测结果显示，与细胞对照组比较，3种镧盐和HCl处理组细胞存活率均降低(P<0.01)，而H2SO4和HNO3处理组细胞存活率均未见明显改变。RT-q PCR结果显示，与细胞对照组比较，La2(SO4)3,La Cl3和La(NO3)3均可诱导Hep G2细胞ANPEP,CYP1A1,OSBPL7,CYP3A5,CACNG4,DUSP4,RASGRF1和CYP17A1等8个基因m RNA表达上调(P<0.05);SO42-诱导ANPEP和CYP1A1表达(P<0.05);Cl-诱导CYP1A1表达(P<0.05);NO3-诱导ANPEP和CYP3A5 m RNA表达，而抑制CYP1A1和CACNG4 m RNA表达(P<0.05)。归因分析发现，La2(SO4)3和La Cl3的La3+均能诱导Hep G2细胞上述8个基因m RNA表达上调(P<0.05)，但对CYP1A1,CYP3A5,DUSP4和CYP17A1m RNA表达的诱导作用低于La2(SO4)3(P<0.05)，对CYP3A5和RASGRF1 m RNA表达的诱导作用低于La Cl3(P<0.05);La(NO3)3的La3+虽能诱导上述8个基因m RNA表达上调，但ANPEP m RNA的表达上调无统计学意义，且对CYP3A5和CYP17A1 m RNA表达的诱导作用低于La(NO3)3(P<0.05)。此外，3种镧盐的La3+对ANPEP,OSBPL7,CYP3A5,CACNG4,DUSP4,RASGRF1和CYP17A1等7个基因m RNA表达的诱导作用彼此间亦存在差异(P<0.05)。结论 La3+与酸根离子SO42-,Cl-和NO3-均可诱导Hep G2细胞特定基因m RNA表达的改变，La2(SO4)3,La Cl3和La(NO3)3对Hep G2细胞基因m RNA表达的影响是La3+与酸根离子SO42-,Cl-和NO3-共同作用的结果，不应仅归因于La3+。

• 单位
  北京大学; 公共卫生学院; 中国民用航空局民用航空医学中心