H5亚型禽流感病毒HA基因昆虫／杆状病毒系统的表达及对BALB/c小鼠的免疫保护

作者：孟庆文; 刘光亮; 于康震; 童光志; 刘娣; 施建忠; 陈化兰

来源：科技导报, 2006, (03): 5-8.

• 禽流感病毒血凝素
• 重组杆状病毒
• 亚单位疫苗
• 免疫保护 avian influenza hemagglutinin
• recombinant baculovirus
• recombinant vaccine
• protective immunity

经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1／96 H5N1亚型1．7kb HA基因的cDNA,将其克隆到pMD18-T中并测序。亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacA的蜜蜂蜂毒素分泌信号下游中,测序正确后与线性化的杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTM DNA)共转染Sf9昆虫细胞。将重组杆状病毒感染HFive细胞,72h左右收获细胞,超声波裂解,SDS—PAGE结果表明HA基因在重组杆状病毒感染的HFive细胞中获得表达。蛋白胶薄层扫描分析显示:表达的HA蛋白占重组杆状病毒感染细胞总蛋白含量的17．1％。Western-blot 及血凝实验结果显示,表达的禽流感...

• 单位
  黑龙江省农业科学院; 农业部; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室; 东北林业大学