miR-93对延边黄牛垂体细胞GH分泌的影响

作者：娄安钢; 崔长艳; 相思宇; 金太花; 陈莹莹; 张睿; 关立增^*

来源：中国畜牧兽医, 2020, 47(01): 116-123.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2020.01.014

• miR-93
• 延边黄牛
• 垂体细胞
• 生长激素(GH)
• 生长激素释放激素受体(GHRHR)

为了分析血液外泌体miRNA对延边黄牛垂体细胞生长激素(GH)分泌的影响,试验选择在延边黄牛和韩延牛血液外泌体中存在显著差异表达的miR-93,分析其对延边黄牛垂体细胞GH分泌的影响机制。试验首先进行延边黄牛垂体细胞的原代培养,之后将miR-93的mimics(miR-93-mi组)、mimics对照品(NC对照组)、inhibitor(miR-93-in组)、inhibitor对照品(iNC组)转染给已建立的垂体原代细胞,48 h后收集细胞,提取总mRNA和总蛋白。试验利用targetscan和RNAhybrid分析软件对miR-93的靶基因进行预测,并利用双荧光素酶报告基因系统对miR-93的靶关系进行验证;利用实时荧光定量PCR和Western blotting技术分别检测靶基因mRNA转录和蛋白的表达情况,结果表明,miR-93靶向了生长激素释放激素受体(GHRHR)的3′UTR;与NC对照组比较,miR-93-mi组的延边黄牛垂体细胞中GH mRNA转录和蛋白表达均极显著低于NC对照组(P<0.01);miR-93-mi组的GHRH mRNA转录和蛋白表达均极显著低于NC对照组(P<0.01),而miR-93-in组的GHRHR蛋白表达显著高于iNC对照组(P<0.05)。说明miR-93可通过调节GHRHR的表达而调控延边黄牛垂体细胞GH的分泌,进而调控延边黄牛的生长发育。

• 单位
  延边大学; 临沂大学