c-Jun氨基端激酶介导细胞自噬参与肠缺血再灌注肺损伤

作者：郑德义^*; 路露; 王宝云; 杨长煌; 杨扬; 李平洋; 杜娇

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(03).

• 肺损伤
• 肠缺血
• 再灌注损伤
• c-Jun氨基端激酶

目的探讨c-Jun氨基端激酶(JNK)信号通路活化在肠缺血再灌注(II/R)肺损伤的作用及其机制。方法夹闭6～8周龄雄性SD大鼠肠系膜上动脉[SCXK(京)2016-006]建立II/R肺损伤模型, 首先用随机数据表法将36只大鼠随机分为假手术组(Sham)及肠缺血45 min后再灌注即刻(0)、2、6、8、16 h组(每组6只), 蛋白质印迹法(Western blot)检测II/R肺组织磷酸化JNK(p-JNK)及活化蛋白-1(AP-1)蛋白表达;然后再取24只大鼠随机分为Sham组, II/R+溶剂对照组(II/R), II/R+JNK抑制剂组(JNK-), II/R+JNK激动剂组(JNK+), 每组6只, JNK抑制剂SP600125或JNK激动剂Anisomycin预处理大鼠, II/R后6 h处死大鼠提取肺组织, Western blot方法检测肺磷酸化JNK(p-JNK)、AP-1蛋白水平, 免疫荧光检测自噬相关蛋白Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)及p62表达, 测量肺组织湿/干重比(W/D)及苏木精-伊红(HE)染色显微镜观察肺组织病理性学改变, 观察II/R肺损伤情况。所有数据符合正态分布采用单因素方差分析。结果肠缺血后再灌注即刻、2、6、8、16 h肺组织p-JNK蛋白表达显著高于Sham组(1.51±0.01比1.000, q=42.2;2.32±0.01比1.000, q=109.1;4.70±0.03比1.000, q=305.6;3.71±0.04比1.000, q=223.5;2.43±0.01比1.000, q=118.0;P<0.01), II/R后肺组织W/D明显高于sham组(15.37±0.53比9.64±0.11, q=21.2, P<0.01), JNK-组肺p-JNK明显低于II/R组(1.13±0.01比2.46±0.01, q=464.2, P<0.01)。免疫荧光检测显示SP600125预处理大鼠II/R后肺组织Beclin-1、LC3-BⅡ明显低于II/R组, p62蛋白表达高于II/R组, 肺W/D显著低于II/R组(10.90±0.73比15.37±0.53, q=16.6, P<0.01), 组织学检测肺损伤及炎细胞浸润减轻;而JNK+组肺p-JNK及Beclin-1、LC3-BⅡ显著升高, p62明显降低, 肺组织W/D升高, 肺间质增厚、炎细胞浸润明显增多, 部分肺泡内出血。结论 II/R导致肺JNK/AP-1信号通路持续活化, 通过自噬增强加重II/R肺损伤, 抑制JNK信号通路活化通过减低自噬减轻II/R肺损伤。

• 单位
  贵州医科大学; 贵州省人民医院