线粒体活性氧在心肌成纤维细胞NLRP3炎症小体激活中的作用

作者：颜骏; 张浩; 王好; 陶艾彬; 姚永伟; 张国辉; 芮涛^*

来源：江苏大学学报(医学版), 2020, 30(03): 243-247.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.y190064

• 心肌成纤维细胞
• 线粒体活性氧
• NLRP3炎症小体
• 脓毒症

目的:探讨线粒体活性氧在心肌成纤维细胞NLRP3炎症小体激活中的作用。方法:培养原代小鼠心肌成纤维细胞,细胞分为对照组(正常培养组),使用脂多糖刺激的引发组,使用脂多糖加三磷酸腺苷的激活组,以及再加用mito-TEMPO的干预组。通过MitoSOX染色检测各组细胞线粒体活性氧水平;通过蛋白质印迹法检测细胞内NLRP3、凋亡相关微粒样蛋白(ASC)、Pro-caspase-1、Pro-IL-1β及上清液中caspase-1 p20、IL-1β蛋白水平;用酶联免疫吸附法检测上清液中IL-1β蛋白的含量;使用免疫共沉淀法观察ASC与NLRP3蛋白的结合情况。结果:激活组细胞胞内线粒体活性氧水平较对照组明显增加(P <0. 05),而干预组线粒体活性氧水平较激活组明显下降(P <0. 05);心肌成纤维细胞经脂多糖刺激后,细胞内NLRP3和Pro-IL-1β蛋白较对照组明显升高(P <0. 05),干预组中Pro-IL-1β较激活组明显升高(P <0. 05)。激活组上清液中caspase-1 p20和IL-1β较对照组明显升高(P <0. 05),干预组caspase-1 p20和IL-1β较激活组明显减少(P <0. 05)。激活组NLRP3-ASC连接形成复合体,干预组NLRP3和ASC的结合减少。结论:心肌成纤维细胞中线粒体活性氧通过促进NLRP3蛋白和ASC蛋白的结合,使NLRP3炎症小体激活。

• 单位
  江苏大学附属人民医院