选择性环氧化酶抑制剂塞来昔布促进自然杀伤细胞杀伤食管癌细胞的机制

作者：李博文; 徐一帆; 黄岚; 李子豪; 刘亚飞; 齐宇^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(10).

• 食管癌
• 塞来昔布
• 自然杀伤细胞

目的探讨塞来昔布在自然杀伤(NK)细胞对食管癌细胞的杀伤作用中的影响及其机制。方法选择人食管癌细胞系EC-1(所有细胞均来源于中国科学院上海细胞库)按实验转染方案随机分组, 分为实验组(si-ULBP1)、对照组(si-ULBP1 NC)。采用实时定量反转录聚合酶链反应(qPCR)检测EC-1细胞中ULBP1、ULBP2、ULBP3、MICB、PD-L1、4-IBBL在30 μmol/L塞来昔布处理0、6、12、24、36、48、72 h后的表达;小干扰RNA(siRNA)敲除48 h后, 实验组和对照组EC-1细胞ULBP1表达量;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测10、20、30、40、50、60、80、100 μmol/L浓度下, 塞来昔布处理24、36、48 h对EC-1细胞生长的影响;采用流式细胞术分析体外培养14 d后NK细胞、CD107a阳性细胞、干扰素α(IFN-α)表达阳性细胞群的比例;在1∶1、5∶1、10∶1效靶比下, NK细胞对塞来昔布处理EC-1细胞的杀伤效应;siRNA敲除后, NK细胞对实验组和对照组EC-1细胞的杀伤效应。采用t检验比较两组间差异。结果 CCK-8结果显示, 在36 h不同浓度塞来昔布处理条件下, 50 μmol/L组细胞存活率低于10 μmol/L组[(78.82±1.93)%比(91.66±1.50)%, t=9.12, P<0.05], 60 μmol/L组细胞存活率低于20 μmol/L组[(57.65±6.42)%比(91.87±1.07)%, t=9.11, P<0.05], 80 μmol/L组细胞存活率低于30 μmol/L组[(43.53±1.93)%比(90.16±1.50)%, t=33.12, P<0.05], 100 μmol/L组细胞存活率低于40 μmol/L组[(19.79±1.50)%比(88.88±2.57)%, t=40.27, P<0.05]。qPCR结果显示ULBP1组表达量高于ULBP2、ULBP3、MICB、PD-L1、4-IBBL组(ULBP1组μ=6.37比ULBP2组μ=3.76, t=7.95, P<0.01, ULBP3组μ=2.57, t=12.14, P<0.01, MICA组μ=2.32, t=12.27, P<0.01, MICB组μ=1.55, t=12.13, P<0.01, PDL1组μ=0.41, t=17.06, P<0.01, 4-IBBL组μ=0.70, t=13.53, P<0.01);流式细胞术结果显示, NK细胞对塞来昔布处理组EC-1细胞杀伤效应高于对照组[1∶1(12.23±2.70)%比(24.06±1.58)%, t=6.48, P<0.01、2∶1(28.57±2.93)%比(45.49±3.38)%, t=6.54, P<0.01、4∶1(61.50±3.39)%比(74.36±2.94)%, t=4.97, P<0.01、8∶1(88.12±2.48)%比(94.21±3.84)%, t=2.31, P>0.05], NK细胞对敲低si-ULBP1实验组的杀伤效应低于si-ULBP1 NC对照组[(61.58±4.21)%比(88.42±2.63)%, t=9.36, P<0.01]。结论塞来昔布通过上调食管癌细胞中ULBP1的表达增强NK细胞的杀伤效应。

• 单位
  郑州大学第一附属医院