摘要
目的检测miR-92b-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株A549及其顺铂耐药株A549/DDP中的表达,探讨其在顺铂耐药中的作用机制。方法应用实时定量反转录聚合酶联反应(qPCR)检测miR-92b-3p在A549/DDP及A549中的表达;CCK8法分别检测各细胞株转染miR-92b-3p mimics或inhibitor后对DDP敏感度的改变;生物信息学预测及双荧光素酶报告基因验证miR-92b-3p和靶基因的关系。qPCR和Western Blot检测RAD21基因及蛋白的表达。结果 miR-92b-3p在A549/DDP细胞株中呈现低表达(P <0.05),miR-92b-3p mimics转染A549/DDP细胞株后,DDP对转染细胞株的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50)显著低于阴性对照组(P <0.05);同时该细胞株的RAD21的mRNA及蛋白表达水平明显低于阴性对照组(P <0.05)。反之,在A549细胞株中转染miR-92b-3p inhibitor后,得出相反的结论。结论 miR-92b-3p在A549/DDP细胞株低表达,其通过调控RAD21 mRNA及蛋白的表达而逆转A549/DDP细胞对DDP的耐药。
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单位广州医科大学附属第三医院; 广州医科大学附属肿瘤医院; 南方医科大学深圳医院