亚硫酸钠暴露对人正常肝细胞自噬的影响及其作用机制

作者：李明虹; 杨舒筠; 李丹; 李星道; 刘希冲; 高文婷; 姬晓彤; 白剑英^*

来源：中国医科大学学报, 2022, 51(05): 401-408.

• 亚硫酸钠暴露
• 人正常肝细胞
• 自噬
• 影响
• 作用机制

目的 探讨亚硫酸钠(Na2SO3)暴露对人正常肝细胞自噬的影响及其作用机制。方法 人正常肝细胞HL-7702分别暴露于含10%胎牛血清的DMEM培养基(阴性对照组)、0.2%DMSO (溶剂对照组)、Na2SO3暴露组(0.1、1、2.5、5 mmol/L)和20 mmol/L CCl4(阳性对照组) 2 h、48 h。采用CCK-8法检测不同浓度Na2SO3暴露2 h、48 h后各组细胞存活率；免疫荧光法检测Na2SO3各浓度暴露组2 h、48 h自噬相关蛋白LC3B表达水平；Western blotting检测Na2SO3各浓度暴露组2 h、48 h自噬相关蛋白LC3B、p62和AMPK，细胞凋亡相关蛋白caspase-3表达水平；荧光素酶化学发光法测定HL-7702细胞内Na2SO3各浓度暴露组2 h、48 h ATP含量。结果与阴性对照组比较，1、2.5、5 mmol/L Na2SO3暴露组2 h、48 h细胞存活率随Na2SO3浓度的升高而降低(P <0.05)；阳性对照组细胞存活率也明显下降(P <0.05)。与阴性对照组比较，2.5 mmol/L、5 mmol/L Na2SO3暴露组和阳性对照组在48 h时，HL-7702细胞中LC3B免疫荧光强度明显减弱。与阴性对照组比较，HL-7702细胞中LC3B-Ⅱ、p62蛋白在48 h 5 mmol/L Na2SO3暴露组表达显著降低(P <0.05)；活化的caspase-3蛋白在48 h 1、2.5、5 mmol/L Na2SO3暴露组表达升高(P <0.05)。与阴性对照组比较，暴露2 h、48 h时0.1、1、2.5、5 mmol/L Na2SO3暴露组HL-7702细胞中ATP含量显著升高(P <0.05)。结论 高浓度Na2SO3 (5 mmol/L)可能抑制人正常肝细胞自噬而致细胞损伤，其机制可能是通过降低LC3B和p62蛋白表达来实现的。

• 单位
  山西医科大学; 公共卫生学院; 太原市疾病预防控制中心