miR-4728-3p靶向调控PTEN影响小细胞肺癌对阿帕替尼耐药性研究

作者：张洪岩; 朱宝杰; 关嵩; 刘欢

来源：人民军医, 2021, 64(06): 546-551.

• 小细胞肺癌
• 阿帕替尼
• 耐药性
• miR-4728-3p

目的:分析miR-4728-3p对小细胞肺癌细胞阿帕替尼耐药性的影响及其作用机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测小细胞肺癌组织和细胞系NCI-H446、H446/VP中miR-4728-3p表达水平。阿帕替尼作用转染miR-4728-3p抑制剂的H446/VP细胞,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白印迹检测细胞中第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、P21、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和E-钙黏附素(E-cadherin)蛋白水平。双荧光素酶实验验证miR-4728-3p与PTEN的靶向关系。结果:与对照组比较,阿帕替尼组H446/VP细胞存活率、克隆数、凋亡率、迁移和侵袭数以及Cyclin D1、P21、Bax、Bcl-2、E-cadherin和MMP-2蛋白水平均差异不显著(P>0.05)。与阿帕替尼+anti-miR-NC组比较,阿帕替尼+anti-miR-4728-3p组H446/VP细胞miR-4728-3p水平、存活率、克隆数、迁移和侵袭数以及Cyclin D1、Bcl-2和MMP-2蛋白水平均显著降低(P<0.05),凋亡率和P21、Bax和E-cadherin蛋白水平均显著升高(P<0.05)。与阿帕替尼+anti-miR-4728-3p+si-NC组比较,阿帕替尼+anti-miR-4728-3p+si-PTEN组H446/VP细胞miR-4728-3p水平、存活率、克隆数、迁移和侵袭数以及Cyclin D1、Bcl-2和MMP-2蛋白水平均显著升高(P<0.05),凋亡率和P21、Bax和E-cadherin蛋白水平均显著降低(P<0.05)。结论:抑制miR-4728-3p表达可降低小细胞肺癌细胞对阿帕替尼的耐药性,其可能通过靶向负调控PTEN表达发挥作用。