摘要
目的制备人类功能未知基因C16orf54重组蛋白的多克隆抗体,为该基因功能研究奠定基础。方法分离纯化LX2细胞的总RNA,逆转录为cDNA,PCR扩增C16orf54基因的目的片段,构建重组蛋白表达质粒,转化大肠杆菌BL21,制备C16orf54重组蛋白。鉴定表达正确后,利用纯化的C16orf54重组蛋白免疫新西兰大白兔,获得抗C16orf54重组蛋白的多克隆抗体。利用制备的多克隆抗体,采用免疫组织化学技术观察该蛋白在肝细胞内的表达特征。结果 Western blot及生物质谱技术分析证实,重组蛋白表达正确。所制备的多克隆抗体效价>1:320 000,Western blot分析显示,多克隆抗...
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