摘要
该研究基于植物蛋白饮料掺杂使假现象普遍,建立一种针对榛子成分为检测目标的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测技术方法。根据欧洲榛子染色体Ca8(登录号:LR899430.1)基因保守序列(第19517533~19519500 bp),设计榛子成分环介导等温扩增检测特异性引物,构建反应体系,并验证方法的特异性、灵敏度和稳定性;以Real-Time PCR(Polymerase Chain Reaction)为对照方法,采用显著性差异检验(Mc Nemar’s检验)方法,通过32种植物蛋白饮料检测结果验证LAMP方法的性能指标和准确性。该研究建立的LAMP方法特异性强,33种植物成分中除了榛子DNA外,其它植物成分DNA均未获得阳性扩增结果;重复性实验稳定性好(扩增Ct值,RSD=5.41%),最低检出限为0.1%(以质量分数计);通过植物蛋白饮料产品应用性验证,得出方法特异性和灵敏度均为100%,不存在假阳性和假阴性。综上,该研究建立的植物蛋白饮料榛子成分LAMP检测技术,具有操作简单、快速高效(从样品处理到最终结果可在2h内完成)、准确度高等优点,可应用于植物蛋白饮料榛子成分快速检测。
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