汉滩病毒糖蛋白Gn的T细胞表位预测及其跨种属验证

作者：孙报增; 秦聪聪; 张俊琦; 王永凯; 张文标; 刘瑞波; 白天原; 张志辉; 张宇丝; 杨琨; 姜东伯^*

来源：解放军医学杂志, 2023, 48(09): 1000-1010.

• 汉滩病毒
• 糖蛋白
• 表位
• 计算机预测
• 免疫反应性

目的 筛选、鉴定并验证汉滩病毒(HTNV)包膜糖蛋白-N末端(Gn)上的免疫反应性表位。方法 通过UniProt数据库获取HTNV 76-118株Gn蛋白序列。采用IEDB、SMMPMBEC、NetMHCpan 4.1、SYFPEITHI、Rankpep算法预测表位亲和力，VaxiJen v2.0分析免疫原性，Blastp工具计算保守性，HPEPDOCK和EpiDOCK模拟p MHC对接，TBtools进行双向聚类分析，酶联免疫斑点(ELISpot)实验评价表位细胞免疫反应性。结果 通过UniProt数据库获得了HTNV76-118株Gn蛋白序列(PRO＿0000036816)。整合5种亲和力算法，在小鼠H-2亚型中获得了61个优势表位，在人主要组织相容性复合物(MHC)-Ⅰ亚型中得到234个优势表位，MHC-Ⅱ亚型中得到212个优势表位；VaxiJen筛选分别获得H-2、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ亚型强免疫原性优势表位23、110、42个；进一步采用Blastp筛选获得高亲和力、强免疫原性、种间种内保守的MHC-Ⅰ类限制性表位3个，MHC-Ⅱ类限制性表位81个。双向分层聚类分析揭示了小鼠H2-d、H2-b和部分人类白细胞分化抗原(HLA)在提呈HTNV Gn表位上的相似性。ELISpot验证了5个表位具有较强的诱导脾细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)的能力。结论 预测并验证了HTNV Gn上的细胞免疫反应性表位，证实在MHC提呈中病毒抗原存在跨基因、种属、物种的交叉免疫反应性，为预防肾综合征出血热(HFRS)提供了新思路。

• 单位
  基础医学院; 中国人民解放军空军军医大学; 唐都医院