二穗短柄草BdFKF1基因表达、亚细胞定位及蛋白互作分析

作者：李安; 童伟杨; 罗维; 舒健虹; 王小利^*

来源：分子植物育种, 2021, 19(20): 6697-6707.

DOI：10.13271/j.mpb.019.006697

• 二穗短柄草
• FKF1基因
• 亚细胞定位
• 蛋白互作

FKF1在光周期途径中是响应蓝光节律表达的基因,在光周期途径中有重要的作用。为探索二穗短柄草BdFKF1基因的表达模式、亚细胞定位和蛋白互作关系,本研究通过RT-qPCR分析BdFKF1基因在长日照、短日照、连续光照、连续黑暗、昼夜颠倒和长日照下昼夜节律与光周期的调控;构建绿色荧光蛋白融合表达载体转化烟草观察亚细胞定位;同时运用酵母双杂筛选结合初步鉴定2个互作蛋白BdCDF1和BdGI,并用双分子荧光互补(BiFC)和免疫共沉淀法(Co-Immunoprecipitation)进行验证。RT-qPCR分析表明BdFKF1基因在长日照、短日照、连续光照、连续黑暗、昼夜颠倒和长日照下不同发育阶段都保持一定的昼夜节律并受光周期的调控。亚细胞定位显示BdFKF1基因编码的蛋白位于细胞核中;利用X-α-Gal检测到BdFKF1可能与BdCDF1和BdGI有潜在的互作关系,BiFC方法进行验证结果显示BdFKF1与BdCDF1有互作关系,BdFKF1与BdGI互作关系不明显。免疫共沉淀法检测结果表明Bd FKF1与BdCDF1和BdGI都有互作关系,以期为后续该基因的功能验证打下基础。

• 单位
  贵州大学; 贵州省农业科学院; 动物科学学院; 生命科学学院