抑制KLF8基因对CD133+肝癌干细胞亚群比例、裸鼠体内成瘤和肺转移能力的影响

作者：石军梅; 刘英; 刘义冰^*; 王晓翔; 刘纯一

来源：山东医药, 2018, 58(39): 25-29.

• KLF8基因
• 肝癌干细胞
• +表型细胞亚群" name="keyword">CD133+表型细胞亚群
• 体内成瘤能力
• 肺转移能力

目的观察抑制KLF8基因对肝癌干细胞CD133+表型细胞亚群比例、裸鼠体内成瘤和肺转移能力的影响。方法收集肝癌患者的肺转移灶,分离培养原代肝癌细胞,无血清悬浮培养形成肝癌细胞球,经流式分选筛选出CD133+表型的肝癌干细胞细胞亚群(LCSCs)。将KLF8基因的RNA干扰重组慢病毒质粒(sh-KLF8)及其阴性对照空载体质粒(sh-control)分别感染LCSCs,经2. 0μg/m L嘌呤霉素筛选,成功构建稳定敲除KLF8基因的CD133+表型肝癌干细胞株LCSCssh-KLF8及对照细胞株LCSCssh-control,qRT-PCR法检测KLF8 mRNA,流式细胞术检测CD133+表型细胞亚群比例。分别注射LCSCssh-KLF8和LCSCssh-control构建肝癌干细胞裸鼠移植瘤模型,观察敲除KLF8基因对肝癌干细胞裸鼠体内成瘤能力的影响(成瘤重量)。另将LCSCssh-KLF8和LCSCssh-control分别经尾静脉注射到裸鼠体内,构建肝癌干细胞的裸鼠肺转移模型,观察敲除KLF8基因对肝癌干细胞裸鼠体内肺转移能力的影响(肺转移灶个数、KLF8蛋白)。结果与LCSCssh-control比较,LCSCssh-KLF8中KLF8 mRNA相对表达水平降低,分选时CD133+表型干细胞亚群的比例显著降低,裸鼠体内的成瘤重量和肺转移的数量降低,KLF8蛋白阳性着色较少(P均<0. 05)。结论抑制KLF8基因可降低肝癌干细胞CD133+表型细胞亚群比例及体内成瘤、肺转移能力,KLF8基因可能是抑制肝癌发生和进展的关键分子。

• 单位
  河北医科大学第四医院