六味地黄汤加减联合氯沙坦钾对糖尿病肾病大鼠ACE1/AngⅡ/AT1R轴及肠道菌群的影响

作者：杨超茅; 张顺宵; 李园园; 高建东^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 1-12.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20232122

• 血管紧张素转换酶1
• 血管紧张素Ⅱ
• 血管紧张素Ⅱ1型受体
• 肠道菌群
• 六味地黄汤加减

目的：基于血管紧张素转换酶1(ACE1)/血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)轴，探讨六味地黄汤加减防治糖尿病肾病(DKD)肾脏损伤的可能作用机制。方法：随机将50只雄性SD大鼠分为正常组8只，造模组42只，造模组大鼠高糖高脂饲料喂养6周后，予一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35mg·kg-1诱导建立DKD大鼠模型。造模成功后随机分为模型组、中药组(六味地黄汤加减颗粒剂21g·kg-1)、西药组(氯沙坦钾33mg·kg-1)、中西药组(氯沙坦钾33mg·kg-1联合六味地黄汤加减颗粒剂21g·kg-1)，连续灌胃8周后检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、尿蛋白(Up)、尿素氮(Bun)、血肌酐(SCr)；酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清ACE1、AngⅡ、AT1R水平；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肾组织ACE1、AngⅡ，AT1R蛋白表达水平；苏木素-伊红染液(HE)、马松(Masson)、过碘酸雪夫氏(PAS)染色后观察肾组织病理形态学改变；采集各组大鼠粪便标本进行16S rDNA高通量测序分析。结果：与正常组比较，模型组的Up、FBG、Bun、SCr、ACE1、AngⅡ、AT1R水平显著升高(P＜0.01)，肾组织病变严重，ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白表达明显增加(P＜0.01)，厚壁菌门/拟杆菌门(F/B)比值升高，乳杆菌属的物种丰度下降，穆氏菌属、双歧杆菌属的物种丰度升高；与模型组比较，各给药组的Bun、SCr、ACE1、AngⅡ、AT1R水平均明显下降(P＜0.01)，肾脏病变程度有所改善，中药组、中西药组的Up和FBG水平均明显下降(P＜0.01)，西药组和中西药组的ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白，中药组的AngⅡ蛋白表达明显减少(P＜0.01)、ACE1、AT1R蛋白表达明显减少(P＜0.05)，中药组、中西药组的F/B比值降低；西药组和中药组的布劳特氏菌属的物种丰度升高，中药组、中西药组的乳杆菌属、瘤胃球菌科未定属、双歧杆菌属的物种丰度升高，穆氏菌属的物种丰度下降，中药组、中西药组的Chao 1和Ace指数明显增加(P<0.05)；与西药组比较，中西药组的Up水平均下降(P＜0.01)，中西药组的Bun水平显著降低(P＜0.05)；中西药组的ACE1、AT1R水平显著降低(P＜0.01)，ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白表达明显减少(P＜0.05)，肾脏病变程度改善较明显，双歧杆菌属的物种丰度升高，Chao 1和Ace指数明显增加(P<0.05)。结论：六味地黄汤加减联合氯沙坦钾可通过调节ACE1/AngⅡ/AT1R轴减轻肾脏纤维化，提升大鼠乳杆菌属、双歧杆菌属的物种丰度，降低穆氏菌属的物种丰度，并改善肠道菌群的丰富度、均匀度，减轻肾脏病理损伤。

• 单位
  上海中医药大学附属曙光医院; 上海中医药大学