摘要

目的掌握云南省中华按蚊的电压门控钠离子通道的kdr基因突变情况。方法 2018年至2019年,在云南省罗平县、绥江县、腾冲市、盈江县、元江县和勐腊县采集蚊虫。采集的蚊虫经形态学鉴定为中华按蚊,用试剂盒提取成蚊基因组DNA。DNA模板经PCR扩增后测序,测序结果经NCBI同源性比对确定为中华按蚊。扩增中华按蚊钠离子通道ⅡS5、ⅡS6片段后测序,测序结果用DNAMAN软件进行多序列比对,用BioEdit软件对测序峰图逐条分析突变情况,确定kdr等位基因类型和基因型并计算频率。结果本次调查扩增得到287条序列,测序峰图显示1014位点共有3种等位基因,包括野生型TTG/L(89.20%)、突变型TTT/F(9.76%)、TCG/S(1.05%);5种基因型:野生型纯合子L/L(85.02%),突变型纯合子F/F(6.27%)、S/S(0.35%),突变型杂合子L/F(6.97%)和L/S(1.39%)。在6个采集点中除绥江外,均以野生型等位基因TTG/L为主。腾冲市的野生型等位基因频率最高(100%),即未检测到突变,而其余各县的1014位点均出现不同程度的突变。绥江的突变型等位基因频率最高,达到55.68%。5种基因型中,罗平、勐腊和绥江各有2种突变型,盈江和元江有1种突变型杂合子L/F。结论云南省大部分地区中华按蚊的kdr基因仍以野生型L1014(TTG/L)为主,kdr突变类型主要为L1014F,其次是L1014S,且突变频率低于中国中部省份。