石榴花对棕榈酸诱导的HepG2细胞脂质沉积的改善作用及机制研究

作者：田晓丹; 金晨; 陈志; 曾艳丽; 廖佳伟; 何小燕; 华钰萍; 赵鹏; 张凌^*

来源：中草药, 2023, 54(08): 2462-2470.

• 石榴花
• 高脂血症
• 脂质沉积
• HepG2细胞
• 棕榈酸
• 白桦脂酸
• 木犀草素
• 凋亡
• 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路
• Janus激酶2/信号传导及转录激活因子3通路

目的 探讨石榴花提取物（Punica granatum flower extract,PFE）及其活性成分白桦脂酸和木犀草素对棕榈酸诱导的人肝癌HepG2细胞脂质沉积的改善作用和作用机制。方法 通过CCK-8法测定棕榈酸、辛伐他汀、PFE、白桦脂酸和木犀草素对HepG2细胞活力的影响，以确定后续给药剂量。利用500μmol/L棕榈酸建立HepG2细胞脂质沉积模型，同时给予PFE(50、100、200 mg/L)、白桦脂酸（40、80、160μmol/L）、木犀草素（40、80、160μmol/L）进行干预，采用油红O染色法测定细胞内脂质含量；GPO-PAP法测定细胞内三酰甘油（triglyceride,TG）和总胆固醇（Total cholesterol,TC）含量；流式细胞仪检测早、晚期凋亡细胞率；Western blotting检测凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)、Janus激酶2/信号传导及转录激活因子3(Janus kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3,JAK2/STAT3)通路相关蛋白表达；qRT-PCR测定PI3K、Akt、JAK2、STAT3的m RNA表达。结果 选取对细胞活力无显著影响的PFE(50、100、200 mg/L)、白桦脂酸（40、80、160μmol/L）和木犀草素（40、80、160μmol/L）进行后续实验。与对照组比较，模型组细胞内脂质、TC和TG含量均显著升高（P<0.001），细胞凋亡率显著升高（P<0.001）,PI3K、Akt、Bax蛋白和PI3K、Akt mRNA表达水平均显著升高（P<0.001）,JAK2、STAT3、Bcl-2蛋白和JAK2、STAT3 mRNA表达水平均显著下降（P<0.001）。与模型组比较，各给药组细胞内脂质、TC和TG含量均显著降低（P<0.05、0.01、0.001），细胞早、晚期凋亡率显著下降（P<0.01、0.001），细胞中PI3K、Akt、Bax蛋白和PI3K、Akt m RNA表达水平均显著降低（P<0.05、0.001）,JAK2、STAT3蛋白和m RNA表达水平均显著升高（P<0.05、0.01、0.001）,PFE组和白桦脂酸组Bcl-2蛋白表达水平均显著升高（P<0.01、0.001）。结论 PFE、白桦脂酸和木犀草素能够改善棕榈酸诱导的HepG2细胞脂质沉积，其作用机制与抑制游离脂肪酸诱导的细胞凋亡、调控PI3K/Akt和JAK2/STAT3通路有关。

• 单位
  江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室; 江西中医药大学药学院