转位分子蛋白经由Keap1/Nrf2/HO-1通路激活自噬缓解大鼠糖尿病神经病理性疼痛

作者：高楠; 郝璨; 马冰洁; 靳天; 马柯; 刘晓明^*

来源：上海交通大学学报 (医学版), 2023, 43(08): 988-996.

DOI：10.3969/j.issn.1674-8115.2023.08.006

• 转位分子蛋白
• 神经病理性疼痛
• 糖尿病
• 自噬
• Keap1/Nrf2/HO-1通路

目的·探讨转位分子蛋白（translocator protein,TSPO）激动剂Ro5-4864对糖尿病神经病理性疼痛（diabetic neuropathic pain,DNP）大鼠坐骨神经自噬和Kelch样ECH关联蛋白（Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1）/核因子E2相关因子（nuclear factor erythroid-derived-2-like 2,Nrf2）/血红素加氧酶-1 (heme oxygenase-1,HO-1)通路的影响。方法·通过高脂饮食和链脲佐菌素构建2型糖尿病模型，经行为学筛选获得DNP大鼠。24只大鼠根据数字表随机分配到假手术组（Sham组）、DNP模型组（DNP组）、TSPO激动剂Ro5-4864处理组（Ro组）和TSPO激动剂Ro5-4864合用Nrf2抑制剂ML385处理组（Ro+ML385组）。采用up-down法测量大鼠50%机械缩足反射阈值（paw 50%mechanical withdrawal threshold, 50%PMWT），时间点选定为处理前（baseline），处理后第3 (D3)、 7 (D7)、 14 (D14)、 21 (D21)和28(D28)天。在最后1天收集坐骨神经，使用免疫荧光和Western blotting分析鞘内注射Ro5-4864对DNP大鼠坐骨神经中自噬相关蛋白和Keap1/Nrf2/HO-1通路相关蛋白的影响。结果·与Sham组相比，DNP组大鼠的50%PMWT自第3天开始大幅下降，全程无改善（各时间点均P=0.000）；另外，DNP大鼠坐骨神经中Bcl-2相互作用蛋白（Bcl-2 interacting coiled-coil protein 1,Beclin-1）、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ（microtubule-associated protein light chain 3-Ⅱ，LC3-Ⅱ）、HO-1和核Nrf2蛋白的含量显著减少（均P=0.000）,p62则显著增加（P=0.000）。鞘内注射Ro5-4864改善了以上损伤，大鼠50%PMWT与DNP组相比逐渐上升（D14 P=0.039,D21和D28均P=0.000），自噬和Keap1/Nrf2/HO-1通路的损伤也被修复，表现为Beclin-1、LC3-Ⅱ、HO-1和核Nrf2蛋白含量的升高（均P=0.000）以及p62含量的降低（P=0.001）。但是，Ro5-4864的效应被ML385完全抑制。结论·TSPO激动剂Ro5-4864缓解了DNP，其作用机制可能与通过对Keap1/Nrf2/HO-1通路的正向调节激活了DNP大鼠坐骨神经中的自噬相关。这可能为治疗DNP提供了一个新的策略。

• 单位
  上海交通大学医学院附属新华医院