重组Endocan转染MDCK细胞对其表达骨桥蛋白的影响

作者：陈孝宇; 胡超杰; 左莉; 刘超; 张素梅; 胡若磊; 朱华庆; 周青; 桂淑玉; 汪渊

来源：安徽医科大学学报, 2008, (04): 381-384.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2008.04.006

• 转染
• 基因表达
• 肾肿瘤/遗传学

目的构建Endocan真核表达载体pcDNA3.1-En-docan,转染犬肾小管上皮细胞MDCK,观察其在MDCK中的表达并初步分析其对骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法应用PCR从pET28-Endocan中扩增出Endocan cDNA全长序列,酶切后导入pcDNA 3.1/myc-his A多克隆位点,构建真核表达载体pcDNA3.1-Endocan;瞬时转染MDCK细胞,Western blot检测Endocan和OPN表达。结果经双酶切鉴定及测序分析表明Endocan已经克隆到pcDNA 3.1/myc-his A中。Western blot结果表明转染成功,Endocan表达量增加,且OPN随其而增加。结论Endocan可促进MDCK表达OPN。

• 单位
  安徽医科大学第一附属医院; 生物化学教研室; 安徽医科大学; 安徽省/省部共建教育部重要遗传病基因资源利用重点实验室