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摘要
目的探讨LINC01352对口腔鳞状细胞癌增殖、迁移与侵袭的影响及其机制。方法培养口腔鳞癌SCC25细胞, 分为LINC01352过表达(pc-LINC01352)组及其阴性对照(pc-NC)组、miR-629-5p mimics组及其阴性对照(miR-NC)组, 将pc-LINC01352、pc-NC、miR-629-5p mimics、miR-NC分别转染相应组的SCC25细胞中。pc-LINC01352组和pc-NC组SCC25细胞转染后, 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞中LINC01352、miR-629-5p的相对表达情况, 采用细胞计数试剂盒(CCK)-8检测细胞活力, 采用EdU检测细胞增殖能力, 采用Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力。通过LncRNASNP2在线网站预测LINC01352潜在的下游靶基因及其与LINC01352的结合位点。使用转染后的miR-629-5p mimics组、miR-NC组的SCC25细胞, 采用双荧光素酶报告基因实验验证LINC01352潜在的下游靶基因及其与LINC01352的结合位点。结果 SCC25细胞转染pc-LINC01352后, pc-LINC01352组中LINC01352的相对表达量(4.99±0.77)高于pc-NC组(1.00±0.07), miR-629-5p的相对表达量(0.32±0.01)低于pc-NC组(1.00±0.06), 差异均有统计学意义(t=8.94、15.72, P值均<0.05)。CCK-8检测结果显示, pc-LINC01352组在转染后24、48和72 h的OD值均小于pc-NC组, 差异均有统计学意义(P值均<0.05)。EdU检测结果显示, pc-LINC01352组细胞阳性率为9.37%±1.30%, 低于pc-NC组的25.92%±2.18%, 差异有统计学意义(t=11.29, P=0.001)。pc-LINC01352组的迁移细胞数、侵袭细胞数分别为(63±6)、(50±4)个, 分别低于pc-NC组的(186±9)、(146±8)个, 差异均有统计学意义(t=20.25、19.64, P值均<0.001)。预测LINC01352潜在的下游靶基因为miR·629·5p, LINC01352与miR-629-5p的结合位点为miR-629-5p的3’UTR区。双荧光素酶报告基因实验结果显示, miR-629-5p mimics组LINC01352-WT的荧光素酶活性为0.42±0.04, 低于miR-NC组的1.00±0.05, 差异有统计学意义(t=19.45, P<0.001), 而2组间LINC01352-MT的荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05)。结论上调口腔鳞状细胞癌SCC25细胞中LINC01352的表达水平, 可以降低SCC25细胞的活力, 抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力;其作用机制可能为LINC01352与miR-629-5p的3’UTR区直接结合, 下调了miR-629-5p的表达水平有关。
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