川楝素通过下调c-kit表达抑制GIST-T1细胞增殖并促进其凋亡

作者：胡笑宇; 杨文生; 康政宇; 彭正伟; 李玲; 刘希; 陈诣佳; **^*

来源：第三军医大学学报, 2021, 43(13): 1235-1242.

DOI：10.16016/j.1000-5404.202012232

• 胃肠间质瘤
• 川楝素
• 伊马替尼
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的研究川楝素(toosendanin,TSN)对胃肠间质瘤细胞增殖及凋亡的影响,并对其相关机制进行初步探索。方法不同浓度TSN体外干预GIST-T1细胞,采用CCK-8检测TSN对GIST-T1细胞增殖的影响;根据结果进一步选择实验浓度,分为0、15、30 nmol/L TSN组,50 nmol/L伊马替尼(imatinib,IM)作为阳性对照;流式细胞仪及Hoechst 33342/PI荧光双染检测细胞凋亡及细胞周期;qRT-PCR及Western blot检测c-KIT/PI3K/AKT/mTOR mRNA及相关蛋白表达。结果 TSN可抑制GIST-T1细胞增殖(P<0.01),其48 h IC50为18.75 nmol/L,72 h IC50为17.93 nmol/L。与对照组相比,15、30 nmol/L TSN组,50 nmol/L IM均可引起不同程度细胞凋亡(P<0.01),但各药物组间凋亡率差异无统计学意义。30 nmol/L TSN可使细胞周期发生S期阻滞(P<0.01)。qRT-PCR检测结果显示:15 nmol/L TSN即可下调GIST-T1细胞c-KIT、PI3K、AKT、mTOR mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果也证实:15 nmol/L TSN同样抑制了c-KIT、PI3K、AKT、mTOR及其磷酸化蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论 TSN通过下调c-KIT表达,抑制GIST-T1细胞增殖并促进凋亡,可能是通过PI3K/AKT/mTOR通路发挥作用。

• 单位
  西南医科大学; 西南交通大学