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摘要
背景：生物反应器内球形体培养是既能维持间充质干细胞干性又能大规模扩增的体外培养方法，明确其对干细胞免疫调节作用的影响有利于指导临床应用。目的：探讨旋转生物反应器内球形体培养对人胎盘间充质干细胞炎症因子分泌的影响。方法：从人胎盘组织中分离培养人胎盘间充质干细胞，分别进行二维培养和旋转生物反应器培养，利用倒置相差显微镜、免疫组化染色和CCK-8实验观察细胞形态与增殖能力，RT-qPCR和流式荧光法检测多种炎症因子基因表达与蛋白分泌量。结果与结论：(1)旋转生物反应器内培养的人胎盘间充质干细胞聚集成多细胞球形体，数量与体积逐渐增加；(2)苏木精-伊红染色可见旋转生物反应器内培养4 d的人胎盘间充质干细胞在球形体内分布均匀，形态正常；(3)免疫组化染色显示球形体内有大量人胎盘间充质干细胞的细胞核Ki-67阳性；(4)CCK-8实验结果显示，生物反应器内球形体培养的人胎盘间充质干细胞活力显著高于二维培养的细胞；(5)RT-q PCR和流式免疫荧光法检测结果显示，旋转生物反应器内球形体培养的人胎盘间充质干细胞中白细胞介素1β、白细胞介素4、白细胞介素6、白细胞介素8、白细胞介素10、白细胞介素17、肿瘤坏死因子α和干扰素α的基因表达量和蛋白分泌量显著高于二维培养的细胞；(6)结果表明，旋转生物反应器内球形体培养能显著提高人胎盘间充质干细胞分泌多种炎症因子的能力，加强人胎盘间充质干细胞的免疫调节作用。
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单位南京医科大学第一附属医院; 南方医科大学深圳医院
