五倍子配方颗粒的位点特异性PCR鉴别

作者：胡力; 陈梓媛; 赵玉洋; 金艳; 张辉; 张恬; 仝一丹; 袁媛^*; 蒋超^*

来源：中国现代中药, 2023, 25(08): 1668-1675.

DOI：10.13313/j.issn.1673-4890.20221116002

• 五倍子蚜虫
• 配方颗粒
• 聚合酶链式反应

目的：为保障临床用药的安全性和有效性，建立五倍子药材及其加工制品混伪、掺假特异性聚合酶链式反应（PCR）鉴定方法。方法：根据五倍子细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）基因序列设计引物，筛选出五倍子的稳定引物区间，并在区间内筛选获得五倍子的特异性单核苷酸多态性（SNP）位点，根据SNP位点设计五倍子特异性鉴别引物WBZ-F、WBZ-R，分别收集五倍子及其混伪品，建立五倍子配方颗粒特异性PCR鉴别方法并优化PCR体系，对该方法进行耐受性和适用性考察。结果：退火温度为53℃，循环36次，五倍子及其配方颗粒经PCR及凝胶电泳后，可在约138 bp处观察到单一明亮的特异性鉴别条带，伪品倍蛋蚜虫虫瘿无条带。结论：建立的特异性PCR鉴别方法可准确鉴别五倍子药材、标准汤剂冻干粉、配方颗粒中的五倍子蚜虫源性成分，也可为其他中药配方颗粒的质量标准研究提供参考。

• 单位
  中国中医科学院; 安徽中医药大学