摘要
目的 探讨当归红芪超滤物对H9C2心肌细胞氧糖剥夺/恢复损伤的影响,并探索其可能机制。方法 H9C2心肌细胞进行氧糖剥夺处理6 h,建立心肌细胞缺血再灌注损伤模型。成年Wistar大鼠口服灌胃给药制备药物血清。H9C2心肌细胞造模处理后分为4组:模型组、阳性对照组、当归红芪超滤物组和联合组。空白组为正常H9C2细胞,模型组、阳性对照组、当归红芪超滤物组、联合组分别使用完全培养基、7.5 mg·kg-1·d-1尼可地尔药物血清培养基、10 mg·kg-1·d-1当归红芪超滤物药物血清培养基和联合药物血清(7.5 mg·kg-1·d-1尼可地尔+10 mg·kg-1·d-1当归红芪超滤物)培养基在常氧条件下培养4 h。用酶联免疫吸附实验测定肌钙蛋白T、肌钙蛋白Ⅰ及C-反应蛋白含量;用实时定量-聚合酶链反应检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和胱天蛋白酶-3(Caspase-3)的基因表达;用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)荧光染色法检测细胞增殖;用激光共聚焦显微镜检测Bcl-2、 Caspase-3相关蛋白的表达。结果 空白组、模型组、当归红芪超滤物组、阳性对照组、联合组的肌钙蛋白T含量分别为(11.72±1.13),(99.34±14.85),(68.50±10.42),(65.50±9.98)和(54.83±9.08)ng·L-1;肌钙蛋白Ⅰ含量分别为(7.53±0.59),(38.33±3.94),(26.17±6.67),(23.17±4.84)和(19.83±2.97)ng·L-1;C-反应蛋白含量分别为(3.12±0.80),(32.17±4.56),(20.67±2.49),(18.17±3.48)和(13.83±2.67)mg·L-1;EdU阳性率分别为(69.61±5.03)%,(31.66±1.90)%,(55.81±2.11)%,(57.47±3.67)%和(67.86±4.54)%;Caspase-3基因表达水平分别为0.80±0.13,2.81±0.56,2.03±0.12,2.01±0.12和1.49±0.35;Bcl-2基因表达水平分别为1.56±0.09,1.07±0.13,1.24±0.07,1.24±0.13和1.28±0.12;Bcl-2和Caspase-3相关蛋白的表达的趋势与基因一致。上述指标,模型组与空白组相比,或当归红芪超滤物组、阳性对照组、联合组与模型相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 当归红芪超滤物降低了H9C2心肌细胞氧糖剥夺/恢复刺激后的细胞损伤、细胞凋亡,缓解了心肌细胞氧糖剥夺/恢复损伤。
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单位甘肃中医药大学; 甘肃中医药大学附属医院