脊尾白虾隐花色素基因cry1的克隆及其功能分析

作者：朱佶轩; 戴琴; 高威; 段健诚; 宋崇阳; 张攀; 阎斌伦; 高焕^*

来源：水产学报, 2021, 45(02): 170-178.

• 脊尾白虾
• 隐花色素基因
• 组织表达
• 日节律
• RNA干扰

为探究隐花色素基因(cry1)在甲壳类中的节律调节功能,实验根据脊尾白虾转录组序列,利用RACE技术获得了脊尾白虾cry1的cDNA序列全长并对其进行功能分析。脊尾白虾cry1全长2 190 bp,开放阅读框1 845 bp,5′端非编码区为241 bp,3′端非编码区为104 bp,共翻译出614个氨基酸,预测蛋白质的分子质量为70.5 ku,理论等电点为5.09。同源性分析显示,脊尾白虾cry1与凡纳滨对虾的同源性最高,为71.6%。荧光定量分析结果显示,脊尾白虾cry1在眼柄、鳃、心脏、胃、肝胰腺、性腺、肌肉、肠道和腹索神经中均有表达,其中眼柄的表达量最高,性腺和心脏次之;不同时段的表达结果发现,其表达量在日节律(24 h)中表现出先下降再上升的趋势。不同光色条件下RNA干扰(RNA interference, RNAi)结果显示,注射小干扰RNA(siRNA)后3～6 h蓝光光照下脊尾白虾cry1的表达量显著高于白光光照,9～24 h蓝色和白色光照下的表达量无显著差异,而RNA干扰组的表达量显著低于对照组,此结果表明cry1可能主要响应蓝光周期节律。目前对甲壳类生物钟的研究较少,该研究为深入探究甲壳类生物钟基因的调控机制提供帮助。

• 单位
  江苏省海洋生物技术重点实验室