blaIMP-4合并膜孔蛋白OmpK36缺失介导产酸克雷伯菌碳青霉烯类的耐药研究

作者：孙明月; 肖伟强; 许青霞^*

来源：微生物学免疫学进展, 2023, 51(04): 5-11.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2023.04.002

• 产酸克雷伯菌
• 碳青霉烯类耐药
• 全基因组测序
• β内酰胺酶
• 耐药机制

目的 旨在对1株碳青霉烯类耐药产酸克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella oxytoca,CRKOX)的耐药机制及耐药基因分子特征进行分析。方法 该产酸克雷伯菌株(wzx-IMP)是从1例2岁急性髓系白血病-M7患儿血培养中分离出来，采用全自动细菌鉴定/药敏系统和基质辅助雷射解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)对该CRKOX菌株进行鉴定和抗生素敏感试验(antimicrobial susceptibility testing, AST);通过PCR和DNA序列分析其耐药基因，并采用多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)分析菌株的变异；全基因组测序(whole genome sequencing, WGS)分析菌株耐药基因，比较基因组学对耐药基因进行研究；分析质粒接合转移模块，用大肠埃希菌EC600作为受体菌对菌株wzx-IMP进行接合实验来证实质粒可转移性。结果 全自动细菌鉴定药敏系统和MALDI-TOF-MS鉴定菌株wzx-IMP为产酸克雷伯菌，亚胺培南、美罗培南对其最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)分别为8μg/mL和>8μg/mL;PCR和DNA序列分析发现，该菌株拥有blaIMP-4型耐药基因，该基因位于62 892 bp质粒的IS26相关的Ⅰ类整合子上，该质粒属于IncN1型；MLST分型为ST85型；接合实验显示，blaIMP-4基因可转移至大肠埃希菌EC600;全基因组测序显示，此菌株染色体含有blaOXY-1-1型β内酰胺酶基因，同时伴有OmpK36膜孔蛋白的缺失。结论 该株细菌为ST85型碳青酶烯类耐药产酸克雷伯菌，其对碳青霉烯类抗生素耐药的机制为IMP-4型β内酰胺酶的产生合并OmpK36膜孔蛋白缺失。

• 单位
  郑州大学