泽泻ISSR反应体系的建立与优化

作者：贺佳; 丁小余; 褚必海; 刘冬扬; 丁鸽

来源：南京师大学报(自然科学版), 2006, (03): 86-90.

• 泽泻
• ISSR反应体系
• 建立与优化 Alisma orientalis(Sam.) Juzep
• ISSR reaction system
• establishment and optimization

以四川泽泻为实验试材,采用改进的CTAB法提取了泽泻的高质量总DNA模板,克服了泽泻中所富含的酚类物质的影响.对泽泻ISSR反应体系中各个主要影响因子进行了优化和筛选,建立了标记位点清晰、稳定、重复性好、可用于泽泻ISSR-PCR分析的最适反应体系,它们是:25μL PCR反应体系中,10×Taq酶配套缓冲液,1U Taq DNA聚合酶,1.8~2.0 mmol/L MgC l2,100μmol/L dNTP,0.3μmol/L引物,DNA模板约10~20 ng,退火温度在52~60℃;为进一步研究泽泻居群的ISSR分子标记鉴别奠定了基础.

• 单位
  南京师范大学; 生命科学学院