摘要
为得到中华草龟抗肿瘤活性肽的最佳提取工艺,选用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和复合蛋白酶对龟肉和龟血分别进行酶解单因素和正交试验,并依据其对白血病6T-CEM细胞株,肺癌A549细胞株,肝癌Hep G-2细胞株和乳腺癌MCF-7细胞株的抗癌活性,确定了木瓜蛋白酶的龟肉水解产物对乳腺癌MCF-7细胞株表现出较强的敏感性,再通过正交试验的极差分析与方差分析得出龟肉最佳酶解工艺条件为pH值7.5、酶解温度60℃、加酶量(E/S)0.5%、料液比1∶3,此时抑癌率达到80%左右。对酶解时间对酶解产物的影响也进行了研究,得出酶解时间在8h时,龟肉酶解产物的抗肿瘤活性较强。此外,质谱结果也进一步表明,酶解8h所得小分子肽产物的丰度最大,这为后续抗肿瘤生物活性肽的分离纯化奠定了良好基础。
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