血清3型鸭甲型肝炎病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与初步应用

作者：孙庆歌; 薛霜; 肖爱芳; 马慧慧; 朱薇; 漆世华; 温文生; 舒银辉; 谢红玲; 苏敬良

来源：中国兽药杂志, 2013, (04): 1-5.

• 血清3型鸭甲型肝炎病毒
• 实时荧光定量RT-PCR duck hepatitis A virus serotype 3
• real-time fluorescent quantitative RT-PCR

通过对GenBank公布的鸭甲型肝炎病毒全序列比对,在3型鸭甲肝炎病毒(DHVA-3)5’非编码区的保守区,设计了一对检测引物和一条特异性TaqMan探针,以构建的阳性重组质粒经体外转录合成的RNA作为标准品绘制标准曲线,建立了一种快速检测DHAV-3的实时荧光定量RT-PCR方法。该方法能特异性地检测出DHAV-3,而与血清1型鸭肝炎病毒(DHAV-1)、鸭瘟病毒、新城疫病毒、禽流感病毒(H9)、呼肠孤病毒、传染性支气管炎病毒无交叉反应。在1.8×103～1.8×108copies/μL的检测范围内标准曲线线性关系较好,R2为0.992。敏感性试验表明,最低检测限为36拷贝数RNA。用该方法...

• 单位
  中国农业大学