人补体调节蛋白MCP、CD59共表达体系的构建及其功能研究

作者：徐莉; 赵舟宙; 刘辉; 李文鑫

来源：中国生物工程杂志, 2007, (09): 8-13.

DOI：10.13523/j.cb.20070902

• 人补体调节蛋白
• 双基因重组表达载体
• 共表达
• 超急性排斥反应 Human complement regulatory proteins Dicistronic vector Co-expression Hyperacute rejection

利用双启动子构建含人补体调节蛋白MCP和CD59 cDNA的双顺反子重组表达载体pcDNA3-MCPCD59-DP,以磷酸钙沉淀法转染NIH3T3细胞,用G418筛选获得NIH3T3pcDNA3-MCPCD59-DP转化细胞。PCR实验结果显示人MCP和CD59整合在转化的NIH3T3细胞的染色体上,RT-PCR和Western blot实验分别从RNA水平和蛋白质水平证实了人MCP和CD59在转化细胞中的共表达。检测连续传代30次的NIH3T3pcDNA3-MCPCD59-DP结果表明人MCP和CD59基因仍稳定整合在细胞基因组中,并未随着传代而丢失,为稳定的转双基因细胞系。补体溶破实验表明...

• 单位
  武汉大学; 病毒学国家重点实验室; 生命科学学院