食源性单核细胞增生型李斯特菌lmoF23650032基因克隆及序列分析

作者：刘扬扬; 马勋^*; 康立超; 李红欢; 钱凌霄; 江婉琳; 阮婷玉

来源：江苏农业科学, 2020, 48(16): 74-79.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2020.16.012

• 食源性单核细胞增多李斯特菌
• lmoF23650032基因
• PCR
• 生物信息学分析

对食源性单核细胞增生李斯特菌LM5567的lmoF23650032基因进行克隆和序列分析,利用PCR方法对lmoF23650032基因进行扩增,将扩增产物连接到pMD19-T载体上,筛选阳性菌株进行测序比对分析。结果显示,扩增获得的lmoF23650032基因序列长度为811 bp,克隆得到lmoF23650032基因的阳性转化子;生物信息学分析表明,lmoF 23650032蛋白属于跨膜蛋白,无信号肽序列;二级结构中无规则卷曲和延伸链结构占比较大,分别是37.86%和36.89%;序列比对结果表明,LM5567菌株lmoF23650032基因的核苷酸序列与02-6680菌株(4b,奶酪,加拿大)、10-0811菌株(1/2b,螃蟹,加拿大)的相似性均为99.7%;与10-0809菌株(4b,粪便,加拿大)、81-055菌株(4b,脑脊髓液,加拿大)、02-1103菌株、02-1792菌株(4b,奶酪,加拿大)、81-0861菌株(4b,卷心菜,加拿大)的相似性均为99.8%;LM5567 lmoF 23650032基因编码的氨基酸序列与上述菌株相似性均为94.7%。试验成功克隆了lmoF 23650032基因,可为进一步探究lmoF23650032基因功能奠定基础。

• 单位
  石河子大学; 动物科技学院; 新疆农垦科学院