甘薯IbWRKY44的克隆与表达分析

作者:赵彩良; 常璐; 吕运韬; 张洁; 董静静; 刘世芳; 贾小云*
来源:山西农业科学, 2021, 49(12): 1507-1514.

摘要

WRKY家族是植物中一类重要的转录因子,广泛参与植物的生长发育、次生物质代谢以及逆境响应等生物学过程。甘薯中存在许多WRKY基因家族成员,但这些基因是否参与花青素的生物合成尚未报道。研究克隆了在紫心甘薯和白心甘薯块根中差异表达的IbWRKY44基因,其ORF全长为1 401 bp,编码446个氨基酸。系统进化分析表明,Ib WRKY44蛋白与同属旋花科三叶裂薯It WRKY44和牵牛In WRKY44的亲缘关系最近,与葡萄Vv WRKY44的亲缘关系最远。IbWRKY44的启动子中包括激素响应、光响应和厌氧诱导响应等多种元件以及AP1、MYB和MYC等转录因子的结合位点。利用q RT-PCR分析了IbWRKY44在不同甘薯品种中的表达特性,发现IbWRKY44在紫心甘薯块根中的表达量显著高于非紫心甘薯,推测IbWRKY44参与花青素的生物合成。构建了过表达带有绿色荧光的融合表达载体p CAMBIA1300-IbWRKY44-GFP并进行烟草叶片的亚细胞定位分析,结果显示,IbWRKY44基因编码的蛋白定位于细胞核。