用于检测裸盖鱼的RPA引物、探针及检测方法

作者:林霖; 朱成杰; 余灏; 王坤; 吴佳辉; 冯荣虎; 张世伟; 陈国培; 赖心田; 杨国武
来源:2020-06-18, 中国, ZL202010559761.6.

摘要

本发明提供一种检测裸盖鱼的RPA引物、探针和检测方法,是基于裸盖鱼的NADH-(2)基因设计的,RPA探针的长度为46-54bp,且在探针中间距5’端32bp的位置处采用dSpacer修饰,dSpacer分子两侧的距5’端31bp和34bp位置的胸腺嘧啶(dT)分别被荧光基团FAM和淬灭基团BHQ1取代,并且在探针的3’末端也需要通过阻塞基团C3Spacer修饰,RPA技术具有操作简便、反应快速、灵敏度高、特异性强、无需精密仪器等优点,本发明基于RPA技术设计裸盖鱼特异性引物探针,建立的检测方法操作方便,可实现现场检测。本发明的检测方法在15-20分钟内完成检测,可快速样品是否为裸盖鱼。