人乳头瘤病毒58型(HPV58)主要衣壳蛋白L1的可溶性表达及应用

作者：陈玉梅; 栗宁; 薛明岩; 周景明; 祁艳华; 殷佳佳; 张雨晴; 李昱雅; 王爱萍^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2022, 38(06): 553-558.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009385

• 人乳头瘤病58型(HPV58)
• L1蛋白
• 原核表达
• 间接免疫荧光技术(IFA)

目的 原核表达获得人乳头瘤病毒58型主要衣壳蛋白L1(HPV58 L1)并进行鉴定。方法 将HPV58 L1蛋白的重组表达菌pE-SUMO-58 L1(BL21)经IPTG进行诱导表达，SDS-PAGE及Western blot法鉴定重组SUMO-58 L1蛋白的表达情况；经Ni柱纯化获得重组SUMO-58 L1蛋白，经泛素样蛋白酶1(ULP1)酶切去除SUMO标签获得重组HPV58 L1蛋白，红细胞凝集试验(HA)验证HPV58 L1蛋白活性；再将重组HPV58 L1蛋白免疫BALB/c小鼠，ELISA测定免疫血清效价，间接免疫荧光试验(IFA)检测免疫血清与HEK293T细胞瞬时表达的HPV58 L1蛋白的反应情况。结果 重组蛋白SUMO-58 L1在大肠杆菌中可溶性表达量较高，其相对分子质量(Mr)约72 000。经Ni-NTA亲和纯化后，再用ULP1去除SUMO标签最终得到Mr约58 000的HPV58 L1蛋白，该重组蛋白具有类似于HPV病毒的凝集小鼠红细胞的血凝活性，其血凝价为1∶16。ELISA测定HPV58 L1蛋白免疫小鼠血清效价最高可达1∶10 240,且免疫血清可与HEK293T细胞瞬时表达的HPV58 L1蛋白发生特异反应。结论 经大肠杆菌表达系统成功获得了具有血凝活性的重组HPV58 L1蛋白，其免疫血清可用于免疫细胞化学检测真核细胞表达的HPV58 L1蛋白。

• 单位
  生命科学学院; 郑州大学