摘要

目的观察miR-133b基因转染对人胃癌细胞株AGS增殖、迁移及侵袭的影响。方法取对数期生长AGS细胞株,采用脂质体转染法将pc DNA3. 1-pri-miR-133b质粒、pc DNA3. 1空载质粒转染至AGS细胞,分别设为过表达组和空载组,另取不做处理为空白组,每组设置5个复孔。倒置荧光显微镜观察转染效率,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测转染后miR-133b基因表达情况; MTT法检测并对比各组细胞增殖情况;采用划痕试验及Transwell试验检测并对比各组细胞迁移及侵袭情况;采用Western blot法检测并对比各组纤维生长因子受体1(FGFR1)、钠氯依赖γ-氨基丁酸转运体(SLC6A1)、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达情况。结果过表达组和空载组质粒转染效率均大于80%;过表达组miR-133b相对表达量与空白组和空载组相比显著较高(P <0. 05),空白组和空载组相比差异无统计学意义(P> 0. 05);过表达组与空白组和空载组不同时刻MTT实验OD值相比,差异均有统计学意义(P <0. 05),其中过表达组低于空白组和空载组,空白组与空载组比较差异无统计学意义(P> 0. 05);三组MTT实验OD值均随时间延长呈显著升高趋势(P <0. 05);过表达组与空白组和空载组迁移率、穿膜细胞数相比,差异均有统计学意义(P <0. 05),其中过表达组低于空白组和空载组,空白组与空载组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05);过表达组与空白组和空载组FGFR1、SLC6A1、HIF-1α蛋白相对表达量相比,差异均有统计学意义(P <0. 05),其中过表达组高于空白组和空载组,空白组与空载组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 miR-133b过表达可显著抑制人胃癌细胞株AGS的增殖、迁移及侵袭能力,可能与下调FGFR1、SLC6A1、HIF-1α蛋白表达有关。

  • 单位
    荆州市第三人民医院; 湖北省肿瘤医院