摘要
首次报道了一步分离纯化大豆脂肪氧合酶(lipoxygenases, LOXs)的三相分离法。考察了溶剂、温度、pH值、(NH4)2SO4饱和度等参数对纯化倍数和活力回收率的影响。优化后的体系条件为:粗酶液与叔丁醇的体积比为1∶2.5、(NH4)2SO4饱和度为60%,pH值为8、温度为20℃、反应时间为60 min,其纯化倍数为8.2倍,活力回收率为78.2%。由三相法部分纯化的LOXs的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)分析显示,其分子质量约为95 kDa。结果表明三相分离法是从脱脂豆粉中部分纯化LOXs的有效方法。
-
单位南通大学; 生命科学学院; 南通职业大学; 化学化工学院