刺槐素影响人骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡分子机制

作者:陈伟达; 袁磊; 王桁扬; 谭嗣伟; 刘文庆; 苗成利*
来源:中华肿瘤防治杂志, 2020, 27(20): 1616-1621.
DOI:10.16073/j.cnki.cjcpt.2020.20.02

摘要

目的刺槐素(acacetin,Aca)是从豆科植物刺槐的花中提取的一种黄酮类化合物,具有抗感染、抗菌和抗肿瘤等药理作用,但是否具有抗骨肉瘤活性尚不明确。本研究旨在探讨Aca对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法体外常规培养MG-63细胞,用0、15、30、60、120和240μmol/L Aca处理MG-63细胞24或48h后,CCK-8法检测细胞活力,集落形成实验检测细胞增殖,AnnexinⅤ-PI染色检测细胞凋亡,PI染色检测细胞周期,蛋白质印迹法分析Survivin、Cdc25C、c-Met、p-c-Met、Akt和p-Akt蛋白的表达。结果 Aca可抑制MG-63细胞活力,24和48h的IC50分别为77.94和57.36μmol/L,且具有剂量和时间依赖性。MG-63细胞经0、30、60和120μmol/L Aca作用24h后,平板克隆形成实验结果显示,克隆形成率分别为(62.73±4.59)%、(50.42±3.83)%、(37.65±3.14)%和(25.18±2.67)%,差异有统计学意义,F=59.64,P<0.001;AnnexinⅤ-PI染色结果显示,细胞凋亡率分别为(2.41±0.68)%、(9.72±1.43)%、(20.36±1.92)%和(31.85±2.27)%,差异有统计学意义,F=174.89,P<0.001;PI染色结果显示,G2/M期细胞构成比分别为(10.73±1.81)%、(20.36±2.05)%、(31.58±1.72)%和(42.11±2.16)%,差异有统计学意义,F=138.42,P<0.001;蛋白质印迹法结果显示,Survivin和Cdc25C蛋白表达水平以及c-Met和Akt蛋白磷酸化水平随药物剂量增加而降低,两两比较差异均有统计学意义,F值分别为110.49、70.85、93.72和96.14,均P<0.001。结论 Aca可诱导MG-63细胞发生G2/M期阻滞和凋亡,这可能与其下调Survivin和Cdc25C蛋白表达,以及抑制c-Met/Akt信号通路有关。