猪支气管败血波氏杆菌菌毛fimD基因的克隆表达及间接ELISA检测方法的建立

作者：何华; 裴洁; 吴斌; 赵战勤; 张建民; 罗勇; 向敏; 卢顺

来源：畜牧兽医学报, 2009, (01): 98-102.

• 支气管败血波氏杆菌
• fimD
• 克隆
• 表达
• ELISA Bordetella bronchiseptica
• clone
• expression
• ELISA

参照GenBank上支气管败血波氏杆菌的菌毛fimD基因序列(X75811),设计1对引物,从本实验室分离鉴定的猪源支气管败血波氏杆菌中扩增出fimD编码区1 098 bp的片段,将其克隆至原核表达载体pET-28a,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行融合表达。SDS-PAGE和Western blot检测证实该表达产物以包涵体形式存在,大小约42 ku,与用支气管败血波氏杆菌菌体制备的阳性血清能发生特异性反应。将包涵体变性和复性后包被酶标板建立间接ELISA(fimD-ELISA),特异性良好。用fimD-ELISA检测临床送检的668份血清,阳性率为30.7%。用该法与微量凝集试验平行...

• 单位
  华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室