摘要
目的探究高压脉冲电场(PEF)联合低温等离子体(LTP)对小鼠肝癌细胞杀伤效果。方法小鼠肝癌细胞H22分为肝癌细胞组(无任何处理)、PEF处理组、LTP处理组、联合A组(先行PEF处理后立即行LTP处理)、联合B组(先行LTP处理后立即行PEF处理)、联合C组(同联合A组, 但间隔20 min)、联合D组(同联合B组, 但间隔20 min)。细胞计数试剂盒检测细胞存活率, 流式细胞仪检测凋亡, 荧光标记细胞内活性氧(ROS)并计数。20只4~6周龄健康雌性无特定病原体的昆明小鼠建立皮下移植瘤模型, 随机分为模型组、PBS对照组、PEF实验组、LTP实验组及联合组(LTP+PEF, 无间隔), 每组4只。测量并计算肿瘤相对体积和抑瘤率。结果肝癌细胞组细胞存活率(98.3±0.9)%, PEF处理组(66.8±4.4)%, LTP处理组(62.1±3.9)%, 联合A组(43.7±3.7)%, 联合B组(31.0±1.4)%, 联合C组(46.8±2.9)%, 联合D组(39.0±2.3)%。与肝癌细胞组比较, 各处理组细胞存活率均降低, 且四个联合处理组细胞存活率低于PEF处理组和LTP处理组, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。其中联合B组细胞存活率最低。凋亡检测结果与细胞存活率结果一致。荧光显微镜下, 联合B组细胞ROS荧光明显增多, 且LTP处理组细胞ROS荧光比PEF处理组多。联合B组的ROS阳性细胞百分比高于LTP处理组和PEF处理组, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。联合组抑瘤率和肿瘤相对体积优于PEF实验组和LTP实验组, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 LTP联合PEF对小鼠肝癌细胞杀伤效果优于PEF和LTP单一处理, 有望成为新的肿瘤治疗方法。
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单位西安交通大学第一附属医院; 长安大学