摘要
目的:观察蒙药那仁满都拉联合BMSCs对大鼠骨折愈合过程中的机制研究。方法:制备桡骨骨折模型,按照随机数字表法依次分为空白组、模型组、蒙药那仁满都拉联合BMSCs组、BMSCs组和蒙药那仁满都拉组,每组20只,其中空白组为正常大鼠,蒙药那仁满都拉联合BMSCs组则是在桡骨骨折部位皮下注射2μg/kg的经蒙药那仁满都拉处理过的BMSCs,BMSCs组则是皮下注射2μg/kg的BMSCs,蒙药那仁满都拉组则是皮下注射2μg/kg蒙药那仁满都拉,模型组和对照组则是给予等剂量的无菌生理盐水,每日皮下注射两次,连续治疗14d。X射线、HE染色观察骨折愈合情况,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量,WB、RT-PCR检测ERK/MAPK信号通路相关分子和BMP-2、BMP-9、VEGF表达情况。结果:X射线拍摄结果显示,与空白组相比,蒙药那仁满都拉联合BMSCs组第2周骨折愈合程度相近,Lane-Sandhu评分差异无统计学意义(P>0.05),模型组、BMSCs组和蒙药那仁满都拉组骨折愈合缓慢,但BMSCs组和蒙药那仁满都拉组Lane-Sandhu评分高于模型组(P<0.05);HE染色显示,模型组血管内皮细胞数量较少,大量的炎性介质浸润,空白组和蒙药那仁满都拉联合BMSCs组成纤维细胞的数量较为丰富,胶原纤维的排列趋于整齐,血管内皮细胞清晰可见,BMSCs组和蒙药那仁满都拉组可见少量的炎性介质浸润,二者的组织恢复程度不及蒙药那仁满都拉联合BMSCs组;模型组TNF-α、IL-6、p-ERK、p-MAPK、BMP-2、BMP-9、VEGF蛋白和mRNA水平明显高于空白组,差异具有统计学意义(P<0.05),蒙药那仁满都拉联合BMSCs组、BMSCs组和蒙药那仁满都拉组TNF-α、IL-6、p-ERK、p-MAPK、BMP-2、BMP-9、VEGF蛋白和mRNA水平明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),且蒙药那仁满都拉联合BMSCs组TNF-α、IL-6、p-ERK、p-MAPK、BMP-2、BMP-9、VEGF蛋白和mRNA水平明显低于BMSCs组和蒙药那仁满都拉组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:蒙药那仁满都拉联合BMSCs治疗可以明显改善骨折愈合,其作用机制可能是通过调控ERK/MAPK信号通路实现。
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单位内蒙古民族大学附属医院