双荧光素酶报告技术验证miR-6857-3p对SP110基因的靶向调控作用

作者：李新月; 王雪; 贾鹏霞; 张万江; 程江; 吴江东^*; 马雅静^*

来源：农垦医学, 2020, 42(02): 97-100.

• 双荧光素酶报告技术
• miR-6857-3p
• SP110

目的:通过双荧光素酶报告系统验证miR-6857-3p对SP110基因的靶向调控作用。方法:从人巨噬细胞基因组中获取SP110基因的3′UTR序列,构建SP110基因的3′UTR野生型及SP110的3′UTR突变型双荧光素酶报告基因载体,分别将双荧光素酶报告质粒(psi CHECK-2-SP110-3′UTR和psi CHECK-2-SP110-3′UTR-6857mut)和miRNA质粒(miR-6857-3p mimic、miR-4772-3p mimic、miR-4659b-3p mimic和miRNA mimic nc)共转染到293T细胞,进行荧光活性测定。结果:与对照组相比,携带miR-6857-3p mimic和SP110野生型3’UTR的构建体的相对荧光素酶活性产生明显下降(P<0.001),SP110突变型3’UTR的构建体的相对荧光素酶活性下降没有统计学意义P>0.05)。结论:miR-6857-3p可以直接靶向SP110的3′UTR序列,SP110是miR-6857-3p的直接靶基因。

• 单位
  石河子大学; 新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室; 石河子大学医学院第一附属医院