优降宁对CYP3A4/3A7基因启动子和增强子区组蛋白甲基化修饰及其转录的影响

作者：何航; 王沛; 李世刚; 陈钰龙; 阚全程; 张莉蓉

来源：药学学报, 2017, 52(01): 91-98.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2016-0767

• 个体发育
• 细胞色素P450 3A4
• 表观遗传
• 组蛋白甲基化
• 核受体
• 优降宁

观察优降宁(pargyline)对细胞色素P450 3A(cytochrome P450 3A,CYP3A)亚型CYP3A4/3A7启动子及增强子区组蛋白甲基化修饰及其基因转录的影响。原代分离培养人胎肝细胞,分为空白对照组、溶媒组、优降宁低、中、高(0.6、1.2、2.4 mmol·L-1)浓度组,Hep G2细胞用0.03、0.3、3 mmol·L-1优降宁处理48 h,观察组蛋白甲基化修饰对CYP3A4/3A7基因表达的影响;3 mmol·L-1优降宁处理组与对照组的HepG2细胞进行染色质免疫共沉淀,选取特异CYP3A4/3A7启动子、增强子区位点设计引物进行实时定量PCR,H3K4me2富集以input百分比表示观察富集的改变。结果表明,优降宁能促进人原代胎肝细胞、HepG2细胞增殖生长,与溶媒对照组相比,优降宁(1.2、2.4 mmol·L-1)显著升高人原代胎肝细胞CYP3A7表达水平,且优降宁(3 mmol·L-1)显著升高HepG2细胞CYP3A4/3A7表达水平(P<0.001);CYP3A4近端启动子区(-362+53)和增强子区(-7 836-6 093)的肝细胞核因子4A(hepatocyte nuclear factors 4A,HNF4A)结合位点及CYP3A7启动子区(-163+103)和增强子区(-4 054-3 421,-6 265-6 247)的糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合位点与对照组相比,处理组均表现为H3K4me2高度修饰(P<0.01,P<0.001)。提示优降宁诱导CYP3A4/3A7启动子及增强子区HNF4A、GR结合位点H3K4me2高度富集激活CYP3A4/3A7基因转录。

• 单位
  河南中医药大学; 基础医学院; 郑州大学第一附属医院; 郑州大学